Mikroskoop on nagu optiline instrument. Mikroskoobi eraldusvõime. Valgusmikroskoopide klassifikatsioon. Parem on näha üks kord või ülikõrge eraldusvõimega mikroskoopia Kuidas suurendada mikroskoobi eraldusvõimet

Pildikvaliteet kindlaks määratud mikroskoobi eraldusvõime, st. minimaalne kaugus, mille juures mikroskoobi optika suudab eristada kahte üksteise lähedal asuvat punkti. eraldusvõime sõltub objektiivi, kondensaatori ja preparaati valgustava valguse lainepikkusest numbrilisest avast. Numbriline ava (ava) oleneb objektiivi esiläätse ja kondensaatori ning preparaadi vahel paikneva kandja nurgaavast ja murdumisnäitajast.

Nurgeline objektiivi ava- see on maksimaalne nurk (AOB), mille juures preparaadist läbinud kiired võivad läätsesse siseneda. Objektiivi numbriline ava võrdub poole nurkava siinuse ja objektiklaasi ja objektiivi esiläätse vahel asuva keskkonna murdumisnäitaja korrutisega. N.A. = n sinα kus, N.A. - numbriline ava; n on preparaadi ja objektiivi vahelise keskkonna murdumisnäitaja; sinα - nurga α siinus, mis võrdub poolega nurgast AOB diagrammil.

Seega ei saa kuivade süsteemide ava (objektiivi esiläätse ja ettevalmistusõhu vahel) olla suurem kui 1 (tavaliselt mitte suurem kui 0,95). Preparaadi ja objektiivi vahele asetatud keskkonda nimetatakse immersioonivedelikuks või immersiooniks ning immersioonivedelikuga töötamiseks mõeldud läätse nimetatakse immersiooniks. Tänu õhust kõrgema murdumisnäitajaga keelekümblusele on võimalik suurendada objektiivi arvulist ava ja seega ka lahutusvõimet.

Objektiivide numbriline ava on alati graveeritud nende raamidele.
Mikroskoobi eraldusvõime sõltub ka kondensaatori avast. Kui lugeda kondensaatori ava võrdseks objektiivi avaga, siis on lahutusvalemiks R=λ/2NA, kus R on eraldusvõime piir; λ - lainepikkus; N.A - numbriline ava. Sellest valemist on näha, et vaadeldes nähtavas valguses (spektri roheline osa - λ=550nm), ei saa eraldusvõime (eraldusvõime piir) olla suurem kui 0,2 µm

Mikroskoobi objektiivi numbrilise ava mõju pildikvaliteedile

Optilise eraldusvõime parandamise viisid

Kõrge valguskoonuse nurga valik, nii objektiivi pool kui valgusallika pool. Tänu sellele on võimalik objektiivi väga õhukestelt struktuuridelt rohkem murdunud valguskiiri koguda. Seega on esimene viis eraldusvõime suurendamiseks kasutada kondensaatorit, mille numbriline ava ühtib objektiivi numbrilise avaga.

Teine võimalus on kasutada immersioonivedelikku objektiivi esiläätse ja katteklaasi vahel. Seega toimime esimeses valemis kirjeldatud keskmise n murdumisnäitaja alusel. Selle optimaalne sukelvedelike jaoks soovitatav väärtus on 1,51.

Sukeldusvedelikud

Sukeldusvedelikud Need on vajalikud spetsiaalselt nende vedelikega töötamiseks mõeldud ja vastavalt märgistatud sukelobjektiivide arvulise ava ja vastavalt eraldusvõime suurendamiseks. Objektiivi ja preparaadi vahele asetatud sukeldumisvedelikel on suurem murdumisnäitaja kui õhul. Seetõttu ei haju objekti väikseimate detailide poolt kõrvalesuunatud valguskiired preparaadist lahkudes ja sisenevad objektiivi, mis toob kaasa eraldusvõime suurenemise.

Olemas on läätsed veeimmersiooniks (tähistatud valge rõngaga), õliimmersiooniks (must rõngas), glütseriini immersiooniks (kollane rõngas), monobromonaftaleeni immersiooniks (punane rõngas). Bioloogiliste preparaatide valgusmikroskoopias kasutatakse vee- ja õliimmersiooni objektiive. Glütseriini sukeldamisega spetsiaalsed kvartsläätsed edastavad lühilainelist ultraviolettkiirgust ja on mõeldud ultraviolett-mikroskoopiliseks (mitte segi ajada luminestsents-) mikroskoopiaks (see tähendab ultraviolettkiirgust selektiivselt neelavate bioloogiliste objektide uurimiseks). Bioloogiliste objektide mikroskoopias ei kasutata monobromonaftaleeni sukeldusobjektiive.

Destilleeritud vett kasutatakse immersioonivedelikuna vesiimmersiooniläätsede jaoks, naturaalset (seeder) või sünteetilist teatud murdumisnäitajaga õli.

Erinevalt teistest sukeldusvedelikest õlikümblus on homogeenne, kuna selle murdumisnäitaja on klaasi omaga võrdne või sellele väga lähedane. Tavaliselt arvutatakse see murdumisnäitaja (n) teatud spektrijoone ja teatud temperatuuri jaoks ning see on märgitud õlipudelile. Nii näiteks on immersioonõli murdumisnäitaja katteklaasiga töötamiseks naatriumspektri spektrijoone D jaoks temperatuuril = 20 ° C 1,515 (nD 20 = 1,515), ilma katteklaasita töötamiseks ( nD20 = 1,520).

Apokromaatläätsedega töötamiseks normaliseeritakse ka dispersioon, st spektri erinevate joonte murdumisnäitajate erinevus.

Eelistatav on sünteetilise immersioonõli kasutamine, kuna selle parameetrid on täpsemalt normaliseeritud ja erinevalt seedriõlist ei kuiva see objektiivi esiläätse pinnal ära.

Arvestades ülaltoodut, ärge mingil juhul kasutage immersiooniõli ja eriti vaseliiniõli asendajaid. Mõnes mikroskoopiatehnikas asetatakse kondensaatori ava suurendamiseks kondensaatori ja proovi vahele sukeldumisvedelik (tavaliselt destilleeritud vesi).

Eraldusvõime piirang- see on väikseim vahemaa objekti kahe punkti vahel, mille juures need punktid on eristatavad, s.t. näha mikroskoobi all kahe täpina.

Resolutsioon on määratletud kui mikroskoobi võimet anda eraldi pilte vaadeldava objekti väikestest detailidest. See antakse valemiga:

kus A on arvuline ava, l on valguse lainepikkus; , kus n on selle keskkonna murdumisnäitaja, milles vaadeldav objekt asub, U on ava nurk.

Kõige väiksemate elusolendite ehituse uurimiseks on vaja suure suurenduse ja hea eraldusvõimega mikroskoope. Optiline mikroskoop on piiratud 2000-kordse suurendusega ja selle eraldusvõime ei ole parem kui 250 nm. Need väärtused ei sobi rakkude peente detailide uurimiseks.

118. Ultraviolettmikroskoop.Üks võimalus vähendada

mikroskoobi eraldusvõime piir - lühema lainepikkusega valguse kasutamine. Sellega seoses kasutatakse ultraviolettmikroskoopi, milles mikroobjekte uuritakse ultraviolettkiirtes. Kuna silm seda kiirgust otseselt ei taju, kasutatakse fotoplaate, luminestsentsekraane või elektronoptilisi muundureid. Veel üks viis mikroskoobi eraldusvõime piiri vähendamiseks on suurendada selle keskkonna murdumisnäitajat, milles mikroskoop asub. Selleks asetatakse see sisse sukeldusvedelik nagu seedriõli.

119. Luminestsents- (fluorestsents)mikroskoopia põhineb mõnede ainete võimel luminestseerida, st helendama nähtamatu ultraviolett- või sinise valgusega valgustamisel.

Luminestsentsi värvus nihkub seda ergastava valgusega võrreldes spektri pikema lainepikkuse ossa (Stokesi reegel). Kui luminestsentsi ergastatakse sinise valgusega, võib selle värvus olla rohelisest punaseni, kui luminestsentsi ergastatakse ultraviolettkiirgusega, võib kuma olla nähtava spektri mis tahes osas. See luminestsentsi omadus võimaldab spetsiaalsete valgusfiltrite abil, mis neelavad põnevat valgust, jälgida suhteliselt nõrka luminestsentssära.

Kuna enamikul mikroorganismidel puudub oma luminestsents, värvitakse neid fluorestseeruvate värvainete lahustega. Seda meetodit kasutatakse teatud infektsioonide tekitajate bakterioskoopilisel uurimisel: tuberkuloos (auromiin), teatud viiruste poolt moodustunud rakusisendused jne. Sama meetodit saab kasutada elusate ja fikseeritud mikroorganismide tsütokeemiliseks uurimiseks. Immunofluorestsentsreaktsioonis, kasutades fluorokroomidega märgistatud antikehi, tuvastatakse patsientide seerumis mikroorganismide antigeene või antikehi.

120. Faaskontrastmikroskoopia. Värvimata mikroorganismide mikroskoopial, mis erinevad keskkonnast ainult murdumisnäitaja poolest, valguse intensiivsuses (amplituudis) muutust ei toimu, vaid muutub ainult läbivate valguslainete faas. Seetõttu ei suuda silm neid muutusi märgata ning vaadeldavad objektid näevad välja madala kontrastsusega, läbipaistvad. Selliste objektide vaatlemiseks faasikontrastmikroskoopia, põhineb objekti poolt sisse viidud nähtamatute faasimuutuste muundamisel silmaga nähtavateks amplituudimuutusteks.

Selle mikroskoopiameetodi kasutamisega suureneb järsult elavate värvimata mikroorganismide kontrastsus ja nad tunduvad heledal taustal tumedad või tumedal taustal heledad.

Faaskontrastmikroskoopiat kasutatakse ka koekultuuri rakkude uurimiseks, erinevate viiruste toime jälgimiseks rakkudele jne.

121. Tumevälja mikroskoopia. Tumevälja mikroskoopia põhineb mikroorganismide võimel valgust tugevalt hajutada. Tumevälja mikroskoopia jaoks kasutatakse tavalisi objektiive ja spetsiaalseid tumevälja kondensaatoreid.

Tumevälja kondensaatorite peamine omadus on see, et nende keskosa on tumenenud ja illuminaatorist lähtuvad otsesed kiired ei lange mikroskoobi objektiivi. Objekti valgustavad kaldus külgtalad ja mikroskoobi objektiivi sisenevad ainult preparaadis olevate osakeste poolt hajutatud kiired. Tumevälja mikroskoopia põhineb Tyndalli efektil, mille tuntud näide on õhus leiduvate tolmuosakeste tuvastamine, kui seda valgustab kitsas päikesekiir.

Tumevälja mikroskoopias paistavad mikroorganismid mustal taustal eredalt helendavad. Selle mikroskoopiameetodiga saab tuvastada väikseimaid mikroorganisme, mille mõõtmed jäävad väljapoole mikroskoobi eraldusvõimet. Tumevälja mikroskoopia võimaldab aga näha ainult objekti kontuure, kuid ei võimalda uurida sisestruktuuri.

122. Soojuskiirgus on looduses levinuim elektromagnetkiirguse liik. Seda teostatakse aatomite ja aine molekulide soojusliikumise energia tõttu. Soojuskiirgus on omane kõikidele kehadele igal muul temperatuuril kui absoluutne null.

Kogu keha emissioon E (seda nimetatakse ka energia heleduseks) on energia hulk, mis eraldub keha pindalaühikust 1 sekundi jooksul. Mõõdetud J / m 2 s.

Keha kogu kiirguse neeldumisvõime A (neeldumistegur) on kehas neeldunud kiirgusenergia ja kogu sellele langeva kiirgusenergia suhe; A on mõõtmeteta suurus.

123. Täiesti must keha. Kujutletavat keha, mis neelab igal temperatuuril kogu sellele langeva kiirgusenergia, nimetatakse absoluutselt mustaks.

Kirchhoffi seadus. Kõigi kehade puhul antud temperatuuril on kiirgusteguri E ja neeldumise A suhe konstantne väärtus, mis on võrdne musta keha kiirgusvõimega e samal temperatuuril:

e.

Stefan-Boltzmanni seadus. Musta keha summaarne kiirgusvõime on võrdeline selle absoluutse temperatuuri neljanda astmega:

e=sT 4 ,

kus s on Stefan-Boltzmanni konstant.

Veini seadus. Musta keha maksimaalsele kiirgusele vastav lainepikkus on pöördvõrdeline selle absoluutse temperatuuriga:

l t × T = V,

kus β on konstant Vina.

Põhineb veiniseadusel optiline püromeetria- meetod kuumade kehade (metall - sulatusahjus, gaas - aatomiplahvatuse pilves, tähtede pind jne) temperatuuri määramiseks nende kiirgusspektri järgi. See meetod oli esimene, mis määras Päikese pinna temperatuuri.

124 . Infrapunakiirgus. Elektromagnetkiirgust, mis hõivab nähtava valguse punase piiri (λ= 0,76 μm) ja lühilainelise raadiokiirguse (λ = 1–2 mm) vahelise spektripiirkonna, nimetatakse infrapunaseks (IR). Kuumutatud tahked ained ja vedelikud kiirgavad pidevat infrapunaspektrit.

Infrapunakiirguse terapeutiline kasutamine põhineb selle termilisel toimel. Ravi jaoks kasutatakse spetsiaalseid lampe.

Infrapunakiirgus tungib kehasse umbes 20 mm sügavusele, mistõttu pindmised kihid kuumenevad suuremal määral. Terapeutiline toime on tingitud tekkivast temperatuurigradiendist, mis aktiveerib termoregulatsioonisüsteemi aktiivsust. Suurenenud verevarustus kiiritatud kohas toob kaasa soodsad terapeutilised tagajärjed.

125. Ultraviolettkiirgus. Elektromagnetiline kiirgus,

spektriala, mis asub nähtava valguse violetse piiri (λ = 400 nm) ja röntgenkiirguse pikalainelise osa (λ = 10 nm) vahel, nimetatakse ultraviolettkiirguseks (UV).

Kõrgel temperatuuril hõõguvad tahked ained kiirgavad

märkimisväärne kogus ultraviolettkiirgust. Samas maksimum

energia heleduse spektraaltihedus langeb vastavalt Wieni seadusele 7000 K. Praktikas tähendab see, et tavatingimustes ei saa hallide kehade soojuskiirgus olla efektiivne UV-kiirguse allikas. Kõige võimsam UV-kiirguse allikas on Päike, mille kiirgusest Maa atmosfääri piiril moodustab 9% ultraviolett.

UV-kiirgus on vajalik UV-mikroskoopide, luminestsentsmikroskoopide tööks, luminestsentsanalüüsiks. UV-kiirguse peamine kasutusala meditsiinis on seotud selle spetsiifiliste bioloogiliste mõjudega, mis on põhjustatud fotokeemilistest protsessidest.

126. Termograafia on erinevatest piirkondadest pärit kiirguse registreerimine

kehapinda diagnostilise tõlgendamise eesmärgil. Temperatuuri määratakse kahel viisil. Ühel juhul kasutatakse vedelkristallindikaatoreid, mille optilised omadused on väikeste temperatuurimuutuste suhtes väga tundlikud.

Asetades need indikaatorid patsiendi kehale, on nende värvi muutes võimalik visuaalselt määrata kohalik temperatuurierinevus.

Teine meetod põhineb kasutamisel termokaamerad, mis kasutavad tundlikke infrapunadetektoreid, näiteks fototakisteid.

127. Termograafia füsioloogiline alus. Inimkehas toimuvate füsioloogiliste protsessidega kaasneb soojuse eraldumine, mida kannab ringlev veri ja lümf. Soojusallikas - elusorganismis toimuvad biokeemilised protsessid. Tekkiv soojus kandub verega üle kogu keha. Suure soojusmahtuvuse ja soojusjuhtivusega on ringlev veri võimeline läbi viima intensiivset soojusvahetust keha kesk- ja perifeerse piirkonna vahel. Nahasooneid läbiva vere temperatuur langeb 2-3° võrra.

Termograafia põhineb infrapunakiirguse intensiivsuse suurenemisel patoloogiliste fookuste kohal (verevarustuse suurenemise ja neis esinevate ainevahetusprotsesside tõttu) või selle intensiivsuse vähenemisel piirkondades, kus on vähenenud piirkondlik verevool ja samaaegsed muutused kudedes ja elundites. . Tavaliselt väljendub see "kuuma tsooni" ilmumises. Termograafiat on kaks peamist tüüpi: teletermograafia ja kontakt-kolesteeriline termograafia.

128. Teletermograafia See põhineb inimkeha infrapunakiirguse muundamisel elektrisignaaliks, mis visualiseeritakse termokaamera ekraanil. Tundlikke fototakisteid kasutatakse termokaamerates infrapunakiirguse vastuvõtuseadmetena.

Termokaamera töötab järgmiselt. Infrapunakiirgust fokusseerib läätsesüsteem, misjärel see siseneb fotodetektorisse, mis töötab siis, kui see on jahutatud temperatuurini -196°C. Fotodetektori signaali võimendatakse ja töödeldakse digitaalselt, millele järgneb saadud teabe edastamine värvilise monitori ekraanile.

129. Kontakt vedelkristalltermograafia tugineb anisotroopsete kolesteeriliste vedelkristallide optilistele omadustele, mis väljenduvad termiliselt kiirgavatele pindadele kandmisel värvuse muutumises sillerdavateks värvideks. Kõige külmemad alad vastavad punasele, kuumimad sinisele.

Vedelkristall-kontaktplaadi termograafiat kasutatakse praegu laialdaselt ja edukalt erinevates meditsiinivaldkondades, kuid inimkeha infrapunakiirguse kaugsalvestusmeetodid on leidnud palju suuremat kasutust.

130. Termograafia kliinilised rakendused. Termograafiline diagnostika ei avalda patsiendile välist mõju ega ebamugavust ning võimaldab "näha" patsiendi naha pinnal termilise mustri anomaaliaid, mis on iseloomulikud paljudele haigustele ja kehalistele häiretele.

Termograafia, mis on füsioloogiline, kahjutu, mitteinvasiivne diagnostiline meetod, leiab oma rakendust praktilises meditsiinis väga erinevate patoloogiate diagnoosimisel: piimanäärmete, selgroo, liigeste, kilpnäärme, kõrva-nina-kurguhaiguste, veresoonte, maksa, sapipõie haigused. , sooled, magu, kõhunääre , neerud, põis, eesnääre. Termograafia võimaldab fikseerida muutused patoloogilise protsessi arengu alguses, enne kudede struktuurimuutuste ilmnemist.

131. Rutherfordi (planetaarne) aatomimudel. Selle mudeli järgi on kogu positiivne laeng ja peaaegu kogu aatomi mass (üle 99,94%) koondunud aatomituuma, mille suurus on mõõtmetega võrreldes tühine (suurusjärgus 10 -13 cm). aatomist (10-8 cm). Elektronid liiguvad ümber tuuma suletud (elliptilistel) orbiitidel, moodustades aatomi elektronkihi. Tuuma laeng on absoluutväärtuselt võrdne elektronide kogulaenguga.

Rutherfordi mudeli puudused.

a) Rutherfordi mudelis on aatom ebastabiilne

kogemused näitavad vastupidist;

b) Rutherfordi järgi on aatomi kiirgusspekter pidev, kogemus räägib aga kiirguse diskreetsusest.

132. Aatomi ehituse kvantteooria Bohri järgi. Tuginedes aatomi energiaolekute diskreetsuse kontseptsioonile, täiustas Bohr Rutherfordi aatomimudelit, luues aatomi struktuuri kvantteooria. See põhineb kolmel postulaadil.

Aatomis olevad elektronid ei saa liikuda mööda mis tahes orbiite, vaid ainult mööda täpselt määratletud raadiusega orbiite. Nendel orbiitidel, mida nimetatakse statsionaarseteks, määratakse elektroni nurkimment avaldisega:

kus m on elektroni mass, v on selle kiirus, r on elektroni orbiidi raadius, n on täisarv, mida nimetatakse kvantiks (n=1,2,3, …).

Elektronide liikumisega statsionaarsetel orbiitidel ei kaasne energia kiirgus (neeldumine).

Elektroni ülekandmine ühelt statsionaarselt orbiidilt teisele

millega kaasneb energiakvanti emissioon (või neeldumine).

Selle kvanti väärtus hn võrdub aatomi statsionaarsete olekute energiavahega W 1 – W 2 enne ja pärast kiirgust (neeldumist):

hn=W1-W2.

Seda seost nimetatakse sagedustingimuseks.

133. Spektri liigid. Spekreid on kolm peamist tüüpi: pidev, joon ja triibuline.

Line Spectra

aatomid. Kiirgus on tingitud seotud elektronide üleminekust madalamale energiatasemele.

Triibulised spektrid kiirgavad üksikud põnevil

molekulid. Kiirgust põhjustavad nii elektroonilised üleminekud aatomites kui ka aatomite endi vibratsiooniline liikumine molekulis.

Pidevad spektrid kiirgavad paljude interakteeruvate molekulaarsete ja aatomioonide komplektid.

Põhirolli kiirguses mängib nende osakeste kaootiline liikumine kõrge temperatuuri tõttu.

134. Spektraalanalüüsi mõiste. Iga keemiline element

kiirgab (ja neelab) valgust täpselt määratletud lainepikkusega, mis on omane ainult sellele elemendile. Elementide joonspektrid saadakse spektrograafides pildistamisel, milles valguse lagunemine toimub difraktsioonvõre abil. Elemendi joonspekter on omamoodi "sõrmejälg", mis võimaldab teil seda elementi emiteeritud (või neeldunud) valguse lainepikkuste põhjal täpselt tuvastada. Spektrograafilised uuringud on üks võimsamaid meile kättesaadavaid keemilise analüüsi meetodeid.

Kvalitatiivne spektraalanalüüs- see on aine koostise määramiseks saadud spektrite võrdlemine tabelitega.

Kvantitatiivne spektraalanalüüs viiakse läbi spektrijoonte fotomeetria (intensiivsuse määramine) abil: joonte heledus on võrdeline antud elemendi hulgaga.

Spektroskoobi kalibreerimine. Selleks, et spektroskoopi abil oleks võimalik määrata uuritava spektri lainepikkusi, tuleb spektroskoop kalibreerida, s.o. teha kindlaks seos spektrijoonte lainepikkuste ja spektroskoopi skaala jaotuste vahel, millel need on nähtavad.

135. Spektraalanalüüsi peamised omadused ja ulatus. Spektraalanalüüsi abil on võimalik määrata nii aine aatom- kui molekulaarkoostist. Spektraalanalüüs võimaldab kvalitatiivselt avastada analüüsitud proovi üksikuid komponente ja määrata nende kontsentratsiooni kvantitatiivselt. Väga sarnaste keemiliste omadustega aineid, mida on keemiliste meetoditega raske või isegi võimatu analüüsida, on lihtne spektraalselt määrata.

Tundlikkus spektraalanalüüs on tavaliselt väga kõrge. Otsese analüüsiga saavutatakse tundlikkus 10 -3 - 10 -6%. Kiirus spektraalanalüüs ületab tavaliselt oluliselt teiste meetoditega analüüsimise kiirust.

136. Spektraalanalüüs bioloogias. Bioloogiliste objektide struktuuri määramiseks kasutatakse laialdaselt spektroskoopilist meetodit ainete optilise aktiivsuse mõõtmiseks. Bioloogiliste molekulide uurimisel mõõdetakse nende neeldumisspektreid ja fluorestsentsi. Laserergastuse all fluorestseeruvaid värvaineid kasutatakse rakkude pH ja ioontugevuse määramiseks, samuti valkude spetsiifiliste kohtade uurimiseks. Resonantse Ramani hajumise abil sondeeritakse rakkude struktuur ning määratakse valgu- ja DNA molekulide konformatsioon. Spektroskoopia on mänginud olulist rolli fotosünteesi ja nägemise biokeemia uurimisel.

137. Spektraalanalüüs meditsiinis. Inimkehas on üle kaheksakümne keemilise elemendi. Nende koostoime ja vastastikune mõju tagavad kasvu-, arengu-, seedimise, hingamise, immuunsuse, vereloome, mälu, viljastumise jne protsessid.

Mikro- ja makroelementide ning nende kvantitatiivse tasakaalustamatuse diagnoosimiseks on kõige viljakam materjal juuksed ja küüned. Iga juuksekarv talletab kogu oma kasvuperioodi jooksul terviklikku teavet kogu organismi mineraalide ainevahetuse kohta. Spektraalanalüüs annab täielikku teavet mineraalide tasakaalu kohta pika aja jooksul. Mõningaid mürgiseid aineid saab tuvastada ainult sel viisil. Võrdluseks: tavameetodid võimaldavad määrata vereanalüüsiga testimise ajal alla kümne mikroelemendi suhte.

Spektraalanalüüsi tulemused aitavad arstil diagnoosida ja haiguste põhjuseid otsida, tuvastada peidetud haigusi ja eelsoodumust neile; võimaldada ravimite täpsemat väljakirjutamist ja individuaalsete skeemide väljatöötamist mineraalide tasakaalu taastamiseks.

Spekroskoopiliste meetodite tähtsust farmakoloogias ja toksikoloogias on raske üle hinnata. Eelkõige võimaldavad need analüüsida farmakoloogiliste preparaatide proove nende valideerimise ajal, samuti tuvastada võltsitud ravimeid. Toksikoloogias on ultraviolett- ja infrapunaspektroskoopia võimaldanud Stasi ekstraktidest tuvastada palju alkaloide.

138. Luminestsents nimetatakse keha ülemääraseks soojuskiirguseks antud temperatuuril, mille kestus ületab oluliselt kiirgavate valguslainete perioodi.

Fotoluminestsents. Footonite mõjul tekkivat luminestsentsi nimetatakse fotoluminestsentsiks.

Kemiluminestsents. Keemiliste reaktsioonidega kaasnevat luminestsentsi nimetatakse kemoluminestsentsiks.

139. Luminestsentsanalüüs objektide luminestsentsi vaatluse põhjal, et neid uurida; Seda kasutatakse toidu riknemise algfaasi tuvastamiseks, farmakoloogiliste preparaatide sorteerimiseks ja teatud haiguste diagnoosimiseks.

140. Fotoelektriline efekt nimetatakse väljatõmbamise fenomeniks

elektronid ainest sellele langeva valguse toimel.

Kell väline fotoelektriline efekt elektron lahkub aine pinnalt.

Kell sisemine fotoelektriline efekt elektron vabaneb sidemetest aatomiga, kuid jääb aine sisse.

Einsteini võrrand:

kus hn on footoni energia, n on selle sagedus, A on elektroni tööfunktsioon, on emiteeritud elektroni kineetiline energia, v on selle kiirus.

Fotoefekti seadused:

Metalli pinnalt ajaühikus väljutatavate fotoelektronide arv on võrdeline metallile langeva valgusvooga.

Fotoelektronide maksimaalne kineetiline algenergia

määratakse langeva valguse sageduse järgi ja see ei sõltu selle intensiivsusest.

Iga metalli jaoks on fotoelektrilise efekti punane ääris, st. maksimaalne lainepikkus l 0, mille juures fotoelektriline efekt on veel võimalik.

Väline fotoelektriline efekt leiab rakendust fotokordisti torudes (PMT) ja elektronoptilistes muundurites (EOC). PMT-sid kasutatakse madala intensiivsusega valgusvoogude mõõtmiseks. Nende abiga saab määrata nõrga bioluminestsentsi. Pildivõimendustorusid kasutatakse meditsiinis röntgenpildi heleduse suurendamiseks; termograafias - muuta keha infrapunakiirgus nähtavaks. Lisaks kasutatakse fotosilme metroos turniketi läbimisel, kaasaegsetes hotellides, lennujaamades jne. uste automaatseks avamiseks ja sulgemiseks, tänavavalgustuse automaatseks sisse- ja väljalülitamiseks, valgustuse määramiseks (valgusmõõtur) jne.

141. Röntgenikiirgus on elektromagnetkiirgus lainepikkusega 0,01 kuni 0,000001 mikronit. See paneb fosforiga kaetud ekraani helendama ja fotograafilise emulsiooni mustaks muutma, muutes selle pildistamiseks sobivaks.

Röntgenikiirgus tekib siis, kui elektronid peatuvad järsult, kui nad tabavad röntgentoru anoodi. Katoodi poolt kiiratavad elektronid kiirendatakse esialgselt kiirenduspotentsiaalide erinevusega kiiruseni, mis on suurusjärgus 100 000 km/s. Sellel kiirgusel, mida nimetatakse bremsstrahlungiks, on pidev spekter.

Röntgenikiirguse intensiivsus määratakse empiirilise valemiga:

kus I on vool torus, U on pinge, Z on antikatoodi aine aatomi järjekorraarv, k on konst.

Elektronide aeglustumisest tekkivat röntgenkiirgust nimetatakse "bremsstrahlungiks".

Lühilainepikkusega röntgenikiirgus on tavaliselt suurema läbitungimisvõimega kui pikalainelistel ja neid nimetatakse karm, ja pikalaineline pehme.

Röntgentoru kõrgel pingel koos

Pideva spektriga röntgenkiirgus tekitab joonspektriga röntgenkiirgust; viimane paikneb pideva spektri peal. Seda kiirgust nimetatakse iseloomulikuks, kuna igal ainel on oma joon-röntgenspekter (pidev spekter pärineb anoodainest ja selle määrab ainult röntgentoru pinge).

142. Röntgenkiirguse omadused. Röntgenikiirgusel on kõik valguskiiri iseloomustavad omadused:

1) ei kaldu kõrvale elektri- ja magnetväljas ega kanna seetõttu elektrilaengut;

2) mõjuma fotograafiliselt;

3) põhjustada gaasi ionisatsiooni;

4) võimeline tekitama luminestsentsi;

5) võib murduda, peegelduda, omada polarisatsiooni ja anda interferentsi ja difraktsiooni nähtusi.

143. Moseley seadus. Kuna erinevate ainete aatomitel on olenevalt nende struktuurist erinev energiatase, siis iseloomustavad kiirgusspektrid sõltuvad ka anoodaine aatomite struktuurist. Iseloomulikud spektrid nihkuvad tuumalaengu suurenedes kõrgemate sageduste suunas. Seda mustrit tuntakse Moseley seadusena:

kus n on spektrijoone sagedus, Z on kiirgava elemendi seerianumber, A ja B on konstandid.

144. Röntgenkiirguse koostoime ainega. Olenevalt footoni energia e ja ionisatsioonienergia A suhtest toimub kolm peamist protsessi.

Sidus (klassikaline) hajumine. Pika lainepikkusega röntgenikiirguse hajumine toimub peamiselt ilma lainepikkust muutmata ja seda nimetatakse koherentseks . See tekib siis, kui footoni energia on väiksem kui ionisatsioonienergia: hn<А. Так как в этом случае энергия фотона рентгеновского излучения и атома не изменяются, то когерентное рассеяние само по себе не вызывает биологического действия.

Ebaühtlane hajumine (Comptoni efekt). 1922. aastal A.Kh. Compton avastas kõvade röntgenikiirte hajumist jälgides hajutatud kiire läbitungimisvõime vähenemist võrreldes langeva kiirega. See tähendas, et hajutatud röntgenikiirte lainepikkus oli suurem kui langeva röntgenikiirte lainepikkus. Röntgenkiirte hajumist koos lainepikkuse muutumisega nimetatakse ebakoherentseks ja nähtust ennast Comptoni efektiks.

fotoelektriline efekt. Fotoelektrilises efektis neeldub röntgenkiirgus aatomis, mille tulemusena lendab elektron välja ja aatom ioniseerub (fotoionisatsioon). Kui footoni energiast ei piisa ionisatsiooniks, siis võib fotoelektriline efekt avalduda aatomite ergastamises ilma elektronide emissioonita.

Ioniseeriv toime Röntgenkiirgus väljendub elektrijuhtivuse suurenemises röntgenikiirguse mõjul. Seda omadust kasutatakse dosimeetrias seda tüüpi kiirguse mõju kvantifitseerimiseks.

145. Röntgenikiirguse luminestsents mida nimetatakse mitmete ainete säraks röntgenikiirguse all. Selline plaatina-tsüanogeeni baariumi sära võimaldas Röntgenil kiired avastada. Seda nähtust kasutatakse spetsiaalsete helendavate ekraanide loomiseks röntgenikiirte visuaalseks vaatlemiseks, mõnikord ka röntgenikiirguse toime suurendamiseks fotoplaadil, mis võimaldab neid kiiri fikseerida.

146. Röntgenikiirguse neeldumine kirjeldatud Bougueri seadusega:

F \u003d F 0 e - m x,

kus m on lineaarne sumbumise koefitsient,

x on aine kihi paksus,

F 0 on langeva kiirguse intensiivsus,

F on edastatava kiirguse intensiivsus.

147. Röntgenikiirguse mõju organismile. Kuigi röntgenuuringute ajal on kiirgusega kokkupuude väike, võivad need põhjustada muutusi rakkude kromosoomiaparaadis – kiirgusmutatsioone. Seetõttu tuleks röntgenuuringuid reguleerida.

148. Röntgendiagnostika. Röntgendiagnostika põhineb röntgenikiirguse selektiivsel neeldumisel kudedes ja elundites.

149. Raadioskoopia. Fluoroskoopias saadakse poolläbipaistvast objektist pilt fluoroskoopilisel ekraanil. Tehnika on lihtne ja ökonoomne, võimaldab jälgida elundite liikumist ja kontrastaine liikumist neis. Sellel on aga ka miinuseid: pärast seda ei jää enam dokumenti, mida saaks edasi arutada või kaaluda. Pildi väikseid detaile on ekraanil raske näha. Fluoroskoopiat seostatakse palju suurema kiirguskoormusega patsiendile ja arstile kui radiograafiat.

150. Radiograafia. Röntgenikiirguses on röntgenkiirte kiir suunatud uuritavale kehaosale. Inimkeha läbinud kiirgus langeb filmile, millele pärast töötlemist saadakse pilt.

151. Elektroentgenograafia. Selles langeb patsiendi läbinud röntgenikiir staatilise elektriga laetud seleenplaadile. Sel juhul muudab plaat oma elektripotentsiaali, sellele ilmub elektrilaengute varjatud kujutis.

Meetodi peamiseks eeliseks on võimalus saada kiiresti suur hulk kvaliteetseid pilte ilma kalleid hõbedaühendeid sisaldava röntgenfilmi kasutamata ja ilma “märja” fototöötluseta.

152. Fluorograafia. Selle põhimõte on pildistada röntgenipilt ekraanilt väikeseformaadilisele rullfilmile. Seda kasutatakse elanikkonna massiuuringutes. Meetodi eelisteks on kiirus ja ökonoomsus.

153. Elundite kunstlik vastandamine. Meetod põhineb

kahjutute ainete sissetoomine organismi, mis imenduvad

Röntgenikiirgus on palju tugevam või vastupidi palju nõrgem kui uuritav organ. Näiteks soovitatakse patsiendil võtta baariumsulfaadi vesisuspensioon. Samal ajal ilmub pildile kontrastse massi vari, mis asub maoõõnes. Varju asukoha, kuju, suuruse ja kuju järgi saab hinnata mao asendit, selle õõnsuse kuju ja suurust.

Joodi kasutatakse kilpnäärme kontrastiks. Sel eesmärgil kasutatavatest gaasidest hapnik, dilämmastikoksiid, süsinikdioksiid. Vereringesse võib süstida ainult dilämmastikoksiidi ja süsinikdioksiidi, kuna erinevalt hapnikust ei põhjusta need gaasiembooliat.

154. Röntgenpildi võimendid. Röntgenikiirgust nähtavaks valguseks muundava luminofoorekraani heledus, mida radioloog kasutab fluoroskoopia tegemisel, on sajandikkandelad ruutmeetri kohta (küünal on küünal). See vastab ligikaudu kuuvalguse eredusele pilvitu ööl. Sellise valgustusega töötab inimsilm hämaras nägemisrežiimis, milles peened detailid ja nõrgad kontrasti erinevused on äärmiselt halvasti eristatavad.

Ekraani heledust on võimatu suurendada patsiendi kiirgusdoosi proportsionaalse suurenemise tõttu, mis ei ole juba kahjutu.

Võimaluse seda takistust kõrvaldada pakuvad röntgenikiirguse pildivõimendid (ARI), mis on võimelised suurendama kujutiste heledust tuhandeid kordi elektronide korduva kiirenduse tõttu välise elektrivälja abil. Lisaks heleduse suurendamisele võib URI uuringu ajal oluliselt vähendada kiirgusdoosi.

155. Angiograafia- vereringe kontrasti uurimise meetod

süsteem, milles radioloog sisestab visuaalse röntgenikontrolli all URI ja televisiooni abil veeni õhukese elastse toru – kateetri – ja suunab selle koos verevooluga peaaegu igasse kehapiirkonda, isegi südamesse. Seejärel süstitakse õigel ajal läbi kateetri radioaktiivset läbipaistmatut vedelikku ja samal ajal tehakse üksteisele suurel kiirusel järgnev pildiseeria.

156. Infotöötluse digitaalne meetod. Elektrilised signaalid on pildijärgseks töötlemiseks kõige mugavam vorm. Mõnikord on kasulik rõhutada pildil olevat joont, esile tõsta kontuuri, mõnikord tõsta esile tekstuuri. Töötlemist saab läbi viia nii elektroonilisel analoog- kui ka digitaalsel meetodil. Digitaalseks töötlemiseks teisendatakse analoogsignaalid ADC analoog-digitaalmuundurite abil diskreetsesse vormi ja suunatakse sellisel kujul arvutisse.

Fluoroskoopilisel ekraanil saadavat valguspilti võimendatakse pildivõimendiga (IOC) ja suunatakse läbi optilise süsteemi TT teleri toru sisendisse, muutudes elektriliste signaalide jadaks. ADC abil teostatakse diskreetimine ja kvantimine ning seejärel kirjutamine muutmällu - RAM-i ja pildisignaalide töötlemine vastavalt määratud programmidele. Teisendatud pilt teisendatakse digitaal-analoogmuunduri DAC abil uuesti analoogvormingusse ja kuvatakse videojuhtimisseadme VKU halltoonides kuvari ekraanil.

157. Mustvalgete piltide värviline kodeerimine. Enamik introskoopilisi pilte on ühevärvilised, see tähendab, et neil puuduvad värvid. Kuid inimese normaalne nägemine on värv. Silma võimete täielikuks ärakasutamiseks on mõnel juhul mõttekas meie introskoopilisi pilte nende teisenemise viimases etapis kunstlikult värvida.

Kui silm tajub värvilist pilti, on neid

täiendavaid pildifunktsioone, mis hõlbustavad analüüsi. See

toon, värviküllastus, värvikontrast. Värvides suureneb detailide nähtavus ja silma kontrastitundlikkus kordades.

158. Röntgenravi. Röntgenkiirgust kasutatakse kiiritusravis mitmete haiguste ravis. Röntgenravi näidustused ja taktika on paljuski sarnased gammateraapia meetoditega.

159. Tomograafia. Röntgenikiirtel paiknevate külgnevate elundite ja kudede varjud kantakse arstile huvipakkuva elundi või patoloogilise moodustise kujutisele.

Tomograafia olemus on see, et pildistamise protsessis

röntgentoru liigub patsiendi suhtes, andes terava pildi ainult nendest detailidest, mis asuvad antud sügavusel. Seega on tomograafia kihiline röntgenuuring.

160. Laserkiirgus on sidus võrdselt suunatud

paljude aatomite kiirgus, luues kitsa monokromaatilise valgusvihu.

Laseri töölehakkamiseks on vaja viia suur hulk selle tööaine aatomeid ergastatud (metastabiilsesse) olekusse. Selleks kantakse elektromagnetiline energia tööainele spetsiaalsest allikast (pumpamismeetod). Pärast seda algavad töötavas aines peaaegu samaaegsed kõigi ergastatud aatomite sunnitud üleminekud normaalsesse olekusse koos võimsa footonikiire emissiooniga.

161. Laseri kasutamine meditsiinis.Kõrge energiaga laserid

kasutatakse onkoloogias laserskalpellina. Sellega saavutatakse kasvaja ratsionaalne ekstsisioon, kahjustades minimaalselt ümbritsevaid kudesid, ning operatsiooni saab teha suure funktsionaalse tähtsusega ajustruktuuride läheduses.

Laserkiire kasutamisel on verekaotus palju väiksem, haav on täielikult steriliseeritud ja turse operatsioonijärgsel perioodil minimaalne.

Laser on eriti efektiivne silma mikrokirurgia puhul. See võimaldab glaukoomi ravida silmasisese vedeliku väljavoolu jaoks mõeldud mikroskoopiliste aukudega "torkides". Laser on võrkkesta eraldumise mittekirurgiline ravi.

Madala energiaga laserkiirgus on põletikuvastane, valuvaigistav toime, muudab veresoonte toonust, parandab ainevahetusprotsesse jne; seda kasutatakse eriteraapias erinevates meditsiinivaldkondades.

162. Laseri mõju kehale. Laserkiirguse mõju kehale on paljuski sarnane elektromagnetilise kiirguse mõjuga nähtavas ja infrapunases piirkonnas. Molekulaarsel tasandil toob selline mõju kaasa elusaine molekulide energiataseme muutumise, nende stereokeemilise ümberkorraldamise ja valgustruktuuride koagulatsiooni. Laseriga kokkupuute füsioloogilisi mõjusid seostatakse fotoreaktivatsiooni fotodünaamilise efektiga, bioprotsesside stimuleerimise või pärssimise mõjuga, muutustega nii üksikute süsteemide kui ka organismi kui terviku funktsionaalses seisundis.

163. Laserite kasutamine biomeditsiinilistes uuringutes. Laserdiagnostika üks peamisi valdkondi on kondenseeritud aine spektroskoopia, mis võimaldab analüüsida bioloogilisi kudesid ja visualiseerida neid raku-, subtsellulaarsel ja molekulaarsel tasemel.

Suurendama Mikroskoobi suurendus on defineeritud kui objektiivi suurenduse ja okulaari suurenduse korrutis. Tüüpiliste uurimismikroskoopide okulaari suurendus on 10 ja objektiivi suurendus 10, 45 ja 100. Vastavalt sellele on sellise mikroskoobi suurendus 100 kuni 1000. Mõne mikroskoobi suurendus on kuni 2000. Veelgi suurem suurendus pole mõtet, kuna eraldusvõime ei parane. Vastupidi, pildi kvaliteet halveneb.

Mikroskoobi suurenduse valem

Pildi kvaliteet määratakse mikroskoobi eraldusvõime, st. minimaalne kaugus, mille juures mikroskoobi optika suudab eristada kahte üksteise lähedal asuvat punkti. eraldusvõime sõltub objektiivi, kondensaatori ja preparaati valgustava valguse lainepikkusest numbrilisest avast. Numbriline ava (ava) oleneb objektiivi esiläätse ja kondensaatori ning preparaadi vahel paikneva kandja nurgaavast ja murdumisnäitajast.

Lisaks süsteemi eraldusvõimele iseloomustab objektiivi ava suhet numbriline ava: valguse intensiivsus pildi pindalaühiku kohta on ligikaudu võrdne NA ruuduga. Hea objektiivi NA väärtus on umbes 0,95. Mikroskoop on tavaliselt konstrueeritud nii, et selle kogusuurendus on umbes 1000 NA.

Eraldusvõime piirang- väikseim dist. Mikroskoobi all vaadeldava objekti kahe tihedalt asetseva punkti vahel (tajutakse kahe punktina).

Ava (lat. apertura – auk) optikas – optilise seadme omadus, mis kirjeldab selle võimet koguda valgust ja takistada kujutise detailide difraktsioonihägusust. Sõltuvalt optilise süsteemi tüübist võib see omadus olla lineaarne või nurkmõõde. Reeglina eristatakse optilise instrumendi detailide hulgas spetsiaalselt nn ava diafragma, mis piirab kõige tugevamalt optilist instrumenti läbivate valguskiirte läbimõõtu. Sageli täidab sellise ava diafragma rolli raam või lihtsalt ühe optilise elemendi (läätsed, peeglid, prismad) servad.

Nurga ava - nurk koonilise valgusvihu äärmiste kiirte vahel optilise süsteemi sisendis (väljundis).

Numbriline ava - võrdub objekti ja läätse vahelise keskkonna murdumisnäitaja ja avanurga siinuse korrutisega. Just see väärtus määrab samal ajal kõige täielikumalt ava suhte, mikroskoobi objektiivi lahutusvõime. Objektiivide arvulise ava suurendamiseks mikroskoopias täidetakse objektiivi ja katteklaasi vaheline ruum sukeldusvedelikuga.

nurk Objektiivi ava on maksimaalne nurk (AOB), mille juures proovi läbinud kiired saavad objektiivi siseneda. Numbriline ava objektiivi suurus võrdub poole nurkava siinuse ja objektiivi klaasklaasi ja esiläätse vahel asuva keskkonna murdumisnäitaja korrutisega. N.A. = n sinα kus, N.A. - numbriline ava; n on preparaadi ja objektiivi vahelise keskkonna murdumisnäitaja; sinα - nurga α siinus, mis võrdub poolega nurgast AOB diagrammil.

Seega ei saa kuivade süsteemide ava (objektiivi esiläätse ja ettevalmistusõhu vahel) olla suurem kui 1 (tavaliselt mitte suurem kui 0,95). Preparaadi ja objektiivi vahele asetatud keskkonda nimetatakse immersioonivedelikuks või immersiooniks ning immersioonivedelikuga töötamiseks mõeldud läätse nimetatakse immersiooniks. Tänu õhust kõrgema murdumisnäitajaga keelekümblusele on võimalik suurendada objektiivi arvulist ava ja seega ka lahutusvõimet.

Numbriline ava läätsed on alati nende raamidele graveeritud.

Mikroskoobi eraldusvõime sõltub ka kondensaatori avast. Kui lugeda kondensaatori ava võrdseks objektiivi avaga, siis on lahutusvalemiks R=λ/2NA, kus R on eraldusvõime piir; λ - lainepikkus; N.A - numbriline ava. Sellest valemist on näha, et vaadeldes nähtavas valguses (spektri roheline osa - λ = 550nm) ei saa mikroskoobi eraldusvõime (eraldusvõime piir) olla > 0,2 μm

Keelekümblus (ladina keelest immersio - immersioon) - vedelik, mis täidab ruumi vaatlusobjekti ja spetsiaalse keelekümblusläätse (kondensaatori ja klaasklaasi) vahel. Peamiselt kasutatakse kolme tüüpi immersioonvedelikke: õliimmersioon (MI/Oil), vesiimmersioon (VI/W) ja glütseroolimmersioon (GI/Glyc), viimast kasutatakse peamiselt ultraviolettmikroskoopias.

Keelekümblust kasutatakse juhtudel, kui see nõuab mikroskoobi eraldusvõime suurendamist või selle rakendamist nõuab mikroskoopia tehnoloogiline protsess. Kui see juhtub:

1. nähtavuse suurendamine kandja ja objekti murdumisnäitaja erinevuse suurendamise kaudu;

2. vaadeldava kihi sügavuse suurendamine, mis sõltub kandja murdumisnäitajast.

Lisaks võib sukeldusvedelik vähendada hajutatud valguse hulka, kõrvaldades objektilt pimestamise. See välistab vältimatu valguse kadu objektiivi sisenemisel.

Valguse murdumine - valguskiirte suuna muutus ruumiliselt muutuva murdumisnäitaja n keskkonnas Tavaliselt kasutatakse terminit “R. Koos." kasutatakse optilise leviku kirjelduses. kiirgus ebahomogeenses keskkonnas sujuvalt muutuva n-ga punktist punkti (valguskiirte trajektoorid sellistes keskkondades on sujuvalt kaarduvad jooned). Tavaliselt nimetatakse kiirte suuna järsku muutust kahe erineva n-ga homogeense keskkonna vahelisel liidesel. valguse murdumine. Atm. Optika, prillide optika kasutab traditsiooniliselt terminit "murdumine". Kuna atmosfäär on ebahomogeenne keskkond, on R. s. toimub taevakehade näilises asendis nihe tegeliku suhtes, millega tuleb astronoomias arvestada. R. s. atmosfääris tuleb arvestada ka geodeetilisel. mõõdud. R. s. on miraažide põhjus. R. fenomen koos. võimaldab optilist visualiseerida ebahomogeensused tahkes, vedelas ja gaasilises keskkonnas.

Refraktomeeter ja mina ( alates lat. refractus - murdunud ja kreeka. Metreo - I meede) on meetod ainete uurimiseks, mis põhineb murdumisnäitaja (murdumisteguri) ja selle mõningate funktsioonide määramisel. Refraktomeetriat (refraktomeetrilist meetodit) kasutatakse keemiliste ühendite tuvastamiseks, kvantitatiivseks ja struktuurianalüüsiks ning ainete füüsikalis-keemiliste parameetrite määramiseks.

Murdumisnäitaja n on valguse kiiruste suhe külgnevas keskkonnas. Vedelike ja tahkete ainete puhul on n tavaliselt määratletud õhu suhtes ja gaaside puhul vaakumi suhtes. N väärtused sõltuvad valguse lainepikkusest l ja temperatuurist, mis on näidatud vastavalt ala- ja ülaindeksina. Refraktomeetria meetodid jagatud kahte suurde rühma: objektiivne ja subjektiivne. Vaatamata objektiivsete meetodite vaieldamatule eelisele, lõppeb iga objektiivne uuring reeglina subjektiivsete meetoditega kohandamisega. Objektiivsetel refraktomeetriameetoditel on kaks alarühma:

1. Objektiivne patsiendi suhtes ja subjektiivne arsti suhtes. Näiteks võib tuua skiaskoopia, mille objektiivsed andmed on võimalik saada uuritava skiaskoopilise refleksi arsti subjektiivse hinnangu kaudu. Eesmärk nii uuritava kui ka uurija suhtes, teostatud refraktomeetrilise masina abil.

Valguse polarisatsioon- füüsiline. optiline omadus. kiirgus, mis kirjeldab valguslainete põiki anisotroopiat ehk mitteekvivalentsust dets. suunad valgusvihuga risti olevas tasapinnas. Olendid. väärtus P. lehe arusaamisele. avaldas mõju valguse häired ja eelkõige asjaolu, et kaks vastastikku risti asetsevat polarisatsioonitasandiga valguskiirt otseselt ei sega. P. s. leidnud looduse. selgitus el.-mag. valgusteooria, mille töötas välja aastatel 1865-73 J. C. Maxwell (J. C. Maxwell), hiljem - kvantelektrodünaamikas.

Termini lainete polarisatsioon võttis Malus kasutusele seoses ristsuunaliste mehaaniliste lainetega

Sest polariseeritud valguse vastuvõtmine ja selle tuvastamiseks on olemas spetsiaalsed füüsilised seadmed, mida esimesel juhul nimetatakse polarisaatoriteks ja teisel analüsaatoriteks. Tavaliselt on neil sama struktuur Polariseeritud valguse saamiseks ja analüüsimiseks on mitu võimalust.

1. Polariseerimine polaroididega. Polaroidid on tselluloidkiled, mis on kaetud kõige õhema nodkiniinsulfaadi kristallide kihiga. Polaaroidide kasutamine on praegu kõige levinum viis valguse polariseerimiseks.

2. Polarisatsioon peegelduse kaudu. Kui loomulik valgusvihk langeb mustale poleeritud pinnale, siis on peegeldunud kiir osaliselt polariseeritud. Polarisaatori ja analüsaatorina võib kasutada peeglit või üsna hästi poleeritud tavalist, ühelt poolt asfaltlakiga mustaks tõmmatud aknaklaasi, mida suurem on polarisatsiooniaste, seda korrektsemalt hoitakse langemisnurka. Klaasi puhul on langemisnurk 57°.

3. Polarisatsioon murdumise kaudu. Valguskiir polariseerub mitte ainult peegeldumisel, vaid ka peegeldusel

murdumine. Sel juhul kasutatakse polarisaatori ja analüsaatorina pinu.

Kokku pandud 10-15 õhukest klaasplaati, mis paiknevad neile langevate valguskiirte suhtes 57° nurga all.

Prisma Nicolas (lühend. nicole) on polariseeriv seade, mis põhineb kaksikmurdmise ja täieliku sisepeegelduse mõjul.Nicoli prisma on kaks identset kolmnurkset prismat, mis on valmistatud Islandi spardist, mis on kokku liimitud õhukese kihiga Kanada palsamit. Prismad on töödeldud nii, et ots on läbiva valguse suuna suhtes kaldu 68° nurga all ning liimitavad küljed moodustavad otstega täisnurga. Sel juhul on kristalli optiline telg ( AB) on valguse suunaga 64° nurga all.

Prisma täispolarisatsiooniava on 29°. Prisma eripäraks on väljuva kiire suuna muutumine prisma pöörlemise ajal prisma kaldus otste murdumise tõttu. Prismat ei saa kasutada ultraviolettkiirguse polariseerimiseks, kuna Kanada palsam neelab ultraviolettkiirgust. Suvalise polarisatsiooniga valgus, mis läbib prisma otsa, kogeb kaksikmurdmist, jagunedes kaheks kiireks - tavaliseks, millel on horisontaalne polarisatsioonitasa ( AO) ja erakordne, vertikaalse polarisatsioonitasandiga ( AE). Pärast seda kogeb tavaline tala täielikku sisemist peegeldust ühendustasandil ja väljub läbi külgpinna. Ebatavaline väljub vabalt läbi prisma vastasotsa.

Brewsteri seadus - optikaseadus, mis väljendab murdumisnäitaja suhet sellise nurga all, mille korral liideselt peegeldunud valgus langemistasandiga risti olevas tasapinnas täielikult polariseerub ja murdunud kiir on tasapinnas osaliselt polariseeritud. esinemissagedus ja murdunud kiire polarisatsioon saavutab maksimaalse väärtuse. On lihtne kindlaks teha, et sel juhul on peegeldunud ja murdunud kiired üksteisega risti. Vastavat nurka nimetatakse Brewsteri nurk.

See optiline nähtus on oma nime saanud Šoti füüsiku David Brewsteri järgi, kes avastas selle 1815. aastal.

Brewsteri seadus : , Kus n 12 - teise keskkonna murdumisnäitaja esimese suhtes, θ Br on langemisnurk (Brewsteri nurk).

Ühelt plaadilt Brewsteri nurga all peegeldudes on lineaarselt polariseeritud valguse intensiivsus väga madal (umbes 4% langeva kiire intensiivsusest). Seetõttu kasutatakse peegeldunud valguse intensiivsuse suurendamiseks (või langemistasandiga paralleelsel tasapinnal klaasi edastatava valguse polariseerimiseks) mitut kinnitatud plaati, mis on volditud jalaks - Stoletovi jalaks. Joonisel on lihtne näha, mis toimub. Laske valgusvihul langeda jala ülaosale. Esimene plaat peegeldab täielikult polariseeritud kiirt (umbes 4% esialgsest intensiivsusest), teine ​​​​plaat peegeldab samuti täielikult polariseeritud kiirt (umbes 3,75% esialgsest intensiivsusest) jne. Sel juhul polariseerub jala põhjast väljuv kiir plaatide lisamisel langemistasandiga paralleelsel tasapinnal. täielik murdumine on raadioside jaoks oluline: enamik piitsaantenne kiirgab täpselt vertikaalselt polariseeritud laineid. Seega, kui laine tabab liidest (maa, vesi või ionosfäär) Brewsteri nurga all, siis peegeldunud lainet ei teki ja seega ka kanalit.

Maluse seadus - lineaarselt polariseeritud valguse intensiivsuse sõltuvus pärast selle läbimist polarisaatorist langeva valguse ja polarisaatori polarisatsioonitasandite vahelisest nurgast, kus I 0 - polarisaatorile langeva valguse intensiivsus, I on polarisaatorist väljuva valguse intensiivsus.Erineva (mittelineaarse) polarisatsiooniga valgust saab esitada kahe lineaarselt polariseeritud komponendi summana, millest igaühele kehtib Maluse seadus. Vastavalt Maluse seadusele arvutatakse läbiva valguse intensiivsused kõigis polariseerivates seadmetes, näiteks polariseerivates fotomeetrites ja spektrofotomeetrites. Täiendavalt määratakse kindlaks peegelduskaod, mis sõltuvad Maluse seadusest ja ei ole sellega arvestatud.

Optiliselt aktiivsed ained , keskkond, kus on looduslikud optiline aktiivsus. O.-a. V. jagunevad 2 tüüpi. Seotud 1. neist on optiliselt aktiivsed mis tahes agregatsiooniseisundis (suhkur, kamper, viinhape), teisega - nad on aktiivsed ainult kristallifaasis (kvarts, kinaver). 1. tüüpi ainetes tuleneb optiline aktiivsus nende molekulide asümmeetrilisest struktuurist, 2. tüüpi - molekulide (ioonide) spetsiifilisest orientatsioonist kristalli ühikurakkudes (seonduvate jõudude välja asümmeetria). osakesed kristallvõres). O. kristallid – ja. V. eksisteerivad alati kahel kujul - paremal ja vasakul; sel juhul on parempoolse kristalli võre vasaku võrega peegelsümmeetriline ja seda ei saa sellega ruumiliselt kombineerida (nn enantiomorfsed vormid, vt joon. Enantiomorfism). Parema ja vasaku vormi optiline aktiivsus O. - ja. V. tüübil 2 on erinevad märgid (ja on samades välistingimustes absoluutväärtuses võrdsed), seetõttu nimetatakse neid optilisteks antipoodideks (mõnikord O.-a. ).

Polarisatsioonitasandi pöörlemine valgus – ühendab ühine fenomenoloogiline. efektide rühma ilming, mis koosneb pöörlemisest polarisatsioonitasandid põiklaine interaktsiooni tulemusena anisotroopse keskkonnaga. Naib. V.p.p.-ga seotud mõjud on hästi teada. valgus, kuigi sarnaseid nähtusi täheldatakse ka teistes spektri piirkondades e.-magn. lained (eriti mikrolainevahemikus), aga ka akustikas, elementaarosakeste füüsikas jne. p.p. on tavaliselt tingitud koefitsiendi erinevusest. keskkonna murdumine kahe ringpolariseeritud (mööda paremat ja vasakpoolset ringi) laine (nn ümmargune anisotroopia) ja seda kirjeldab üldjuhul teise järgu aksiaaltensor, mis on seotud nurga aksiaalvektoriga. polarisatsioonitasandi pöörlemine polaarlainevektoriga . Ainult ümmarguse anisotroopiaga keskkonnas saab lineaarselt polariseeritud laine lagundada kaheks normaalseks, võrdse amplituudiga ringpolariseeritud laineks (vt joonis 1). Normaalsed kõikumised), mille vaheline faasierinevus määrab summalaine polarisatsioonitasandi asimuuti Ringikujulise anisotroopiaga homogeenses keskkonnas on nurk V. p. Ringikujuline anisotroopia võib olla kas loomulik (iseeneslik, häirimata olekus söötmele omane) või kunstlik, mis on põhjustatud välisest mõju. Teisel juhul võib ringikujuline asümmeetria olla tingitud häiriva toime asümmeetriast või keskkonna ja häiringu kombineeritud sümmeetriaomadustest.

Pöörlemisnurk. Valguskiir võib olla loomulik ja polariseeritud. Looduslikus valgusvihus tekivad vektori võnked juhuslikult.

Polariseeritud valguskiired jagunevad omakorda lineaarselt polariseeritud kiireteks, kui võnkumised toimuvad kiirega risti asetseval sirgjoonel; polariseeritud ringis, kui vektori ots kirjeldab ringjoont kiire suunaga risti olevas tasapinnas, ja elliptiliselt polariseeritud, mille puhul toimuvad võnked piki ellipsit.

Tasapinda, millel tasapinnaliselt polariseeritud kiires võnkumised toimuvad, nimetatakse võnketasandiks.

Polariseeritud kiire suunda läbivat ja võnketasandiga risti olevat tasapinda nimetatakse polarisatsioonitasandiks.

Valguslaineid saab polariseerida polariseerivate seadmete abil (polaroid, turmaliinplaat, nikool jne).

Jelena 3013

Selles artiklis käsitletakse mikroskoobi suurendust, antud väärtuse mõõtühikuid, instrumendi lahutusvõime visuaalse määramise meetodeid. Räägime ka selle väärtuse standardparameetritest ja sellest, kuidas arvutada konkreetset tüüpi tööde tõusu.

Kõige sagedamini on mikroskoobi peamised võimsusparameetrid näidatud objektiivi silindril. Keerake objektiiv lahti ja kontrollige seda. Näete kahte arvu, mis on kirjutatud murdarvuna. Esimene on suurendus, teine ​​numbriline ava.

Ava iseloomustab seadme võimet koguda valgust ja saada selget pilti. Samuti saab objektiivile märkida toru pikkuse ja tööks vajaliku kattekihi paksuse.

Kõik mikroskoobi suurenduse kohta

Suurendust mõõdetakse kordades (x). Okulaari ja objektiivi süsteemi suhe määrab täielikult selle olulisuse. Okulaari ja objektiivi suurenduse korrutis annab meile teada töösuurenduse, mille see mikroskoop loob. Kogu suurenduse sõltuvus objektiivi suurendusest on ilmne. Võimsad objektiivid on jagatud järgmistesse rühmadesse:

Väike (mitte rohkem kui 10x);

Keskmine (kuni 50x);

suur (rohkem kui 50x);

Eriti suur (rohkem kui 100x).

Optilise mikroskoobi maksimaalne objektiivi suurendus on 2000x. Okulaari väärtus on tavaliselt 10x ja muutub harva. Kuid objektiivi suurendus on väga erinev (4 kuni 100x ja 2000x).

Mikroskoobi valikul tuleb arvestada, kes selle kallal töötab ja millist maksimaalset suurendust võib vaja minna. Näiteks koolieelikule piisab 200x, kooli- ja ülikoolimikroskoobidel on suurendus 400-1000x. Aga uurimisseade peaks andma vähemalt 1500-2000x. See väärtus võimaldab töötada bakterite ja väikeste rakustruktuuridega.

Hinnad veebipoodides:

Oksar.ru-Moskva 900 R


Veel pakkumisi

Instrumendi eraldusvõime

Mis määrab pildi selguse ja kvaliteedi, mille mikroskoop annab? Seda mõjutab seadme eraldusvõime. Selle väärtuse arvutamiseks peate leidma valguse lainepikkuse ja kahe numbrilise ava jagatise. Seetõttu määrab selle kondensaator ja mikroskoobi eesmärk. Tuletame meelde, et objektiivi korpusel on näha ava numbriline väärtus. Mida kõrgem see on, seda parem on seadme eraldusvõime.

Optilise mikroskoobi eraldusvõime piirang on 0,2 mikronit. See on minimaalne kaugus pildist, kui kõik objekti punktid on eristatavad.

Kasulik mikroskoobi suurendus

Kasulikust suurendusest räägime siis, kui uurija silm kasutab täielikult ära mikroskoobi lahutusvõime. See saavutatakse objekti vaatlemisega maksimaalse lubatud nurga all. Kasulik suurendus sõltub ainult numbrilisest avast ja objektiivi tüübist. Kui see on arvutatud, suureneb numbriline ava 500-1000 korda.

Kuiv lääts (ainult õhk objekti ja objektiivi vahel) loob kasuliku suurenduse 1000x, s.t. numbriline ava on 1.

Sukellääts (objekti ja objektiivi vahele jääv keelekümbluskeskkonna kiht) loob kasuliku suurenduse 1250x, s.o. numbriline ava on 1,25.

Hägune või udune pilt näitab, et kasulik suurendus on ülaltoodud väärtustest suurem või väiksem. Seadistatud väärtuse suurendamine või vähendamine halvendab oluliselt mikroskoobi jõudlust.

Selles artiklis rääkisime optilise mikroskoobi põhiomadustest ja nende arvutamise meetoditest. Loodame, et see teave on selle keeruka seadmega töötamisel kasulik.

räägi sõpradele

Mikroskoope kasutatakse mikroorganismide tuvastamiseks ja uurimiseks. Valgusmikroskoobid on mõeldud uurima mikroorganisme, mille suurus on vähemalt 0,2 mikronit (bakterid, algloomad jne) ja elektroonilised mikroskoobid väiksemate mikroorganismide (viirused) ja bakterite väikseimate struktuuride uurimiseks.
Kaasaegne valgusmikroskoobid- Need on keerukad optilised seadmed, mille käsitsemine nõuab teatud teadmisi, oskusi ja suurt täpsust.
Valgusmikroskoobid jagunevad õpilas-, töö-, labori- ja uurimistööks, mis erinevad disaini ja optika poolest. Kodumaistel mikroskoopidel (Biolam, Bimam, Mikmed) on tähistused, mis näitavad, millisesse rühma nad kuuluvad (C - õpilane, R - töötajad, L - laboratoorium, I - uuringud), seadmed on tähistatud numbriga.

Mikroskoop on jagatud mehaaniliseks ja optiliseks osaks.
TO mehaaniline osa sisaldab: statiiv (koosneb alusest ja toruhoidikust) ja sellele paigaldatud toru koos revolvriga läätsede paigaldamiseks ja vahetamiseks, objektilaud ettevalmistamiseks, seadmed kondensaatori ja valgusfiltrite kinnitamiseks, samuti ehitatud mehhanismid statiivi sisse jämedaks (makromehhanism, makrokruvi) ja peeneks
(mikromehhanism, mikrokruvi) objektilava või toruhoidiku liigutamiseks.
Optiline osa Mikroskoopi esindavad objektiivid, okulaarid ja valgustussüsteem, mis omakorda koosneb objektilava all paiknevast Abbe kondensaatorist, lameda ja nõgusa küljega peeglist ning eraldi või sisseehitatud illuminaatorist. Objektiivid keeratakse revolvri sisse ja toru vastasküljele paigaldatakse vastav okulaar, mille kaudu pilti vaadeldakse. Seal on monokulaarsed (ühe okulaariga) ja binokulaarsed (kahe identse okulaariga) torud.

Mikroskoobi ja valgustussüsteemi skemaatiline diagramm

1. Valgusallikas;
2. Koguja;
3. Iirisevälja diafragma;
4. Peegel;
5. Iirise ava diafragma;
6. Kondensaator;
7. Narkootikumid;
7". Preparaadi tegelik vahepilt, moodustatud eesmärgi järgi;
7"". Preparaadi suurendatud virtuaalne lõpppilt, mida vaadeldakse okulaaris;
8. Objektiiv;
9. väljundobjektiivi ikoon;
10. Okulaari ava ava;
11. Okulaar;
12. Silm.

Mängib suurt rolli pildi saamisel objektiiv. See loob objektist suurendatud, tõelise ja ümberpööratud kujutise. Seejärel suurendatakse seda pilti läbi okulaari vaadates veelgi, mis sarnaselt tavapärase luubiga annab suurendatud virtuaalse pildi.
Suurendama mikroskoopi saab ligikaudselt määrata, korrutades objektiivi suurenduse okulaari suurendusega. Suurendus aga ei määra pildi kvaliteeti. Määratakse pildi kvaliteet, selle selgus mikroskoobi eraldusvõime, st võime eristada eraldi kahte tihedalt asetsevat punkti. Eraldusvõime piirang- minimaalne kaugus, mille juures need punktid on veel eraldi nähtavad - sõltub objekti valgustava valguse lainepikkusest ja objektiivi numbrilisest avast. Numbriline ava sõltub omakorda objektiivi nurgaavast ning objektiivi esiläätse ja preparaadi vahelisest keskkonnast. Nurgaava on maksimaalne nurk, mille all objekti läbivad kiired võivad objektiivi siseneda. Mida suurem on ava ja mida lähemal on läätse ja preparaadi vahelise keskkonna murdumisnäitaja klaasi murdumisnäitajale, seda suurem on läätse eraldusvõime. Kui loeme kondensaatori ava võrdseks objektiivi avaga, on eraldusvõime valem järgmine:

kus R on eraldusvõime piir; - lainepikkus; NA - numbriline ava.

Eristama kasulik Ja kasutu suurendama. Kasulik suurendus võrdub tavaliselt 500-1000 korda suurendatud objektiivi numbrilise avaga. Suurem silmasuurendus ei too esile uusi detaile ja on kasutu.
Olenevalt objektiivi ja preparaadi vahel olevast kandjast on olemas väikese ja keskmise suurendusega (kuni 40x) "kuivad" läätsed ning maksimaalse ava ja suurendusega (90-100x) sukelläätsed. "Kuiv" lääts on lääts, mille esiläätse ja proovi vahel on õhk.

Sukelläätsede eripäraks on see, et sellise objektiivi esiläätse ja preparaadi vahele asetatakse immersioonvedelik, mille murdumisnäitaja on sama kui klaasil (või selle lähedal), mis tagab numbrilise ava ja eraldusvõime suurenemise. objektiivist. Vesiimmersioonläätsede immersioonivedelikuna kasutatakse destilleeritud vett ja õlikümblusläätsede jaoks seedriõli või spetsiaalset sünteetilist immersioonõli. Eelistatav on sünteetilise immersioonõli kasutamine, kuna selle parameetrid on täpsemalt normaliseeritud ja erinevalt seedriõlist ei kuiva see objektiivi esiläätse pinnal ära. Spektri ultraviolettpiirkonnas töötavate läätsede puhul kasutatakse glütserooli sukeldusvedelikuna. Ärge mingil juhul kasutage immersiooniõli ja eriti vaseliiniõli asendajaid.
**Läätsedega saadud pildil on erinevaid puudusi: sfäärilised ja kromaatilised aberratsioonid, pildivälja kumerus jne. Mitmest objektiivist koosnevates objektiivides on need puudused mingil määral korrigeeritud. Sõltuvalt nende puuduste korrigeerimise astmest eristatakse akromaatilised läätsed ja keerulisemad apokromaatilised läätsed. Sellest lähtuvalt nimetatakse läätsi, milles pildivälja kumerust korrigeeritakse, plaaniakromaatideks ja plaaniapokromaatideks. Nende objektiivide kasutamine annab terava pildi kogu välja ulatuses, samas kui tavaliste objektiividega saadud pilt ei ole vaatevälja keskel ja servades sama teravusega. Tavaliselt on selle raamile graveeritud kõik objektiivi omadused: oma suurendus, ava, objektiivi tüüp (APO - apokromaat jne); veekümblusläätsedel on tähis VI ja valge rõngas ümber raami alumises osas, õlikümblusläätsedel on tähis MI ja must rõngas.
Kõik objektiivid on loodud töötama 0,17 mm katteklaasiga.
Katteklaasi paksus mõjutab pildikvaliteeti eriti tugevate kuivade süsteemidega (40x) töötamisel. Sukelobjektiividega töötamisel ei tohiks kasutada katteklaase, mille paksus on üle 0,17 mm, kuna katteklaasi paksus võib olla suurem kui objektiivi töökaugus ning sellisel juhul, kui proovite objektiivi näidisele fokuseerida, objektiivi esiklaas võib kahjustuda.
Okulaarid koosnevad kahest läätsest ja neid on samuti mitut tüüpi, millest igaüht kasutatakse kindlat tüüpi objektiividega, kõrvaldades veelgi pildi ebatäiuslikkuse. Okulaari tüüp ja selle suurendus on märgitud selle raamile.
Kondensaator on ette nähtud illuminaatorist tuleva valguse fokuseerimiseks preparaadile, mis on suunatud mikroskoobi või illuminaatori peegli abil (kui kasutatakse kinnitatud või sisseehitatud illuminaatorit). Üks kondensaatori detaile on ava diafragma, mis on näidise õigeks valgustamiseks hädavajalik.
Illuminaator koosneb jämeda hõõgniidiga madalpinge hõõglambist, trafost, kollektorläätsest ja välja diafragmast, mille avanemine määrab näidise valgustatud välja läbimõõdu. Peegel suunab valguse illuminaatorist kondensaatorisse. Illuminaatorist kondensaatorisse tulevate kiirte paralleelsuse säilitamiseks on vaja kasutada ainult peegli lamedat külge.

Mikroskoobi valgustuse ja teravustamise seadistamine

Pildikvaliteet sõltub suurel määral ka õigest valgustusest. Proovi mikroskoobi all valgustamiseks on mitu erinevat viisi. Kõige tavalisem viis on valgustuspaigaldised Köhleri ​​järgi, mis on järgmine:
1) seadke illuminaator vastu mikroskoobi peegli;
2) lülitage sisse illuminaatori lamp ja suunake valgus tasasele (!) mikroskoobipeeglile;
3) asetada preparaat mikroskoobi lavale;
4) katta mikroskoobi peegel valge paberilehega ja fokuseerida sellele lambi hõõgniidi kujutis, liigutades illuminaatoris lambipesa;
5) eemalda peeglist paberileht;
6) sulgege kondensaatori ava diafragma. Peeglit liigutades ja kergelt lambipesa liigutades fokusseeritakse hõõgniidi kujutis ava diafragmale. Illuminaatori kaugus mikroskoobist peaks olema selline, et lambi hõõgniidi kujutis oleks võrdne kondensaatori ava diafragma läbimõõduga (ava diafragmat saab jälgida mikroskoobi aluse paremale küljele asetatud lamepeegli abil ).
7) avada kondensaatori ava diafragma, vähendada illuminaatori väljadiafragma avanemist ja oluliselt vähendada lambi hõõguvust;
8) väikese suurendusega (10x) okulaari vaadates saadakse preparaadist terav pilt;
9) peeglit veidi keerates kantakse välja diafragma kujutis, mis näeb välja nagu helge täpp, vaatevälja keskele. Kondensaatorit langetades ja tõstes saavutatakse preparaadi tasapinnas terav kujutis välidiafragma servadest (nende ümber on näha värviline ääris);
10) avada illuminaatori välja diafragma vaatevälja servadeni, suurendada lambi hõõgniidi hõõguvust ja veidi (1/3 võrra) vähendada kondensaatori ava diafragma avanemist;
11) Objektiivi vahetamisel tuleb kontrollida valguse seadistust.
Pärast Koehleri ​​järgi valguse reguleerimise lõpetamist ei ole võimalik kondensaatori asendit ning välja- ja avadiafragma avanemist muuta. Preparaadi valgustust saab reguleerida ainult neutraalsete valgusfiltritega või lambi hõõguvust muutes reostaadi abil. Kondensaatori ava diafragma liigne avamine võib kaasa tuua pildi kontrasti olulise vähenemise ning ebapiisav avamine võib kaasa tuua pildikvaliteedi olulise halvenemise (difraktsioonirõngaste ilmumine). Ava diafragma õige avanemise kontrollimiseks on vaja eemaldada okulaar ja torusse vaadates avada see nii, et see kataks ühe kolmandiku võrra valgusvälja. Preparaadi õigeks valgustamiseks on väikese suurendusega objektiividega (kuni 10x) töötades vaja lahti keerata ja eemaldada kondensaatori ülemine lääts.
Tähelepanu! Kõrget suurendust andvate objektiividega töötamisel - tugevate kuivade (40x) ja immersioon (90x) süsteemidega, et mitte kahjustada eesmist objektiivi, kasutavad nad teravustamisel järgmist tehnikat: küljelt vaadeldes langetage objektiiv alla. makrokruvi peaaegu preparaadiga kokku puutudes, siis okulaari sisse vaadates tõstab makrokruvi objektiivi väga aeglaselt kuni pildi ilmumiseni ning mikrokruvi abil teostatakse mikroskoobi lõplik teravustamine.

Mikroskoobi hooldus

Mikroskoobiga töötades ärge pingutage. Ärge puudutage sõrmedega läätsede, peeglite ja filtrite pindu.
Objektiivide sisepindade ja ka toru prismade kaitsmiseks tolmu eest tuleb okulaar alati torusse jätta. Läätsede välispindade puhastamisel eemalda tolm neilt eetris pestud pehme harjaga. Vajadusel pühkige objektiivi pindu õrnalt puhta bensiini, eetriga või spetsiaalse optika puhastamiseks mõeldud seguga kergelt niisutatud seebivaba linase või kambrilise lapiga. Läätsede optikat ei ole soovitatav ksüleeniga pühkida, kuna see võib põhjustada nende kleepumist.
Välise hõbedaga peeglitelt saab tolmu eemaldada vaid kummist pirniga maha puhudes. Te ei saa neid pühkida. Samuti on võimatu läätsesid ise lahti keerata ja lahti võtta - see toob kaasa nende kahjustamise. Pärast mikroskoobiga töötamise lõpetamist tuleb ülalkirjeldatud viisil hoolikalt eemaldada immersioonõli jäänused objektiivi esiläätsest. Seejärel langetage lava (või fikseeritud staadiumiga mikroskoopides kondensaator) ja katke mikroskoop kaanega.
Mikroskoobi välimuse säilitamiseks tuleb seda perioodiliselt pühkida happevabas vaseliinis kergelt niisutatud pehme lapiga ja seejärel kuiva, pehme puhta lapiga.

Lisaks tavapärasele valgusmikroskoopiale on olemas ka mikroskoopiameetodid, mis võimaldavad uurida värvimata mikroorganisme: faasi kontrast , tumeväli Ja luminestsents mikroskoopia. Mikroorganismide ja nende struktuuride uurimiseks, mille suurus on väiksem kui valgusmikroskoobi eraldusvõime, kasutage